AAV股票代碼
                                                  688238                                                   腺相關病毒股票代碼
                                                  688238
                                                  English
                                                  穩定細胞株構建

                                                  穩定細胞株構建

                                                  全國服務熱線400-151-5198      業務咨詢15800353038　　

                                                  外源基因在細胞中的表達可分為兩大類，一類是瞬時表達，外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，雖然可以達到高水平的表達，但通常只持續幾天；一類是穩定表達（構建穩轉株），外源DNA整合到宿主細胞染色體上，使宿主細胞可長期表達目的基因。
                                                  　　
                                                  　　建立穩定細胞株，基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上，載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中，用載體中所含的抗性標志進行篩選。最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，篩選得到可穩定表達目的蛋白、或穩定沉默特定基因的細胞株。

                                                  篩選方法

                                                  慢病毒感染篩選穩定細胞株
                                                  利用慢病毒整合表達特性來篩選穩定細胞株，該方法克服了傳統質粒挑單克隆方法周期久的弊端，可以在短時間內高效獲取穩定細胞株。

                                                  利用慢病毒制備穩定株優勢
                                                  （1）細胞適用種類廣泛，可用于各種哺乳動物細胞；
                                                  （2）構建穩轉株時間短，表達持續時間長；
                                                  （3）多種熒光標記和抗性基因可選，滿足觀測實驗要求。

                                                  HUVEC

                                                  HepG2

                                                  穩定細胞株分類

                                                  　　混合克隆穩定細胞株
                                                  　　混合克隆細胞系是基因轉染后直接用抗藥篩選得到的，篩選出的細胞都表達抗性基因和目的基因，但包含了各種不同的細胞克隆。不同克隆的目的基因整合位置和表達量均有所不同。
                                                  　　混合克隆細胞株篩選比較快速，費用較低。在需要構建的細胞株轉染效率高，目的基因表達效率高的情況下，單克隆細胞株最后得到的表達效果和混合克隆細胞株并沒有顯著差異，這時多克隆細胞篩選是理想的選擇。
                                                  　　單克隆穩定細胞株
                                                  　　單克隆細胞系是由含有穩定整合外源片段的單個細胞的擴增得到的細胞株，每個細胞的目的基因整合位置的表達量均高度一致，但可能丟失一些表型。單克隆細胞株篩選周期長，費用高。需要進行細胞亞定位實驗的細胞系，難感染的和表達率低的通常建議進行單克隆細胞篩選。

                                                  服務流程

                                                  • 目的基因名稱，種屬等信息
                                                    載體需求（抗性、熒光、便簽等）
                                                    目的細胞等信息
                                                    其它特殊需求
                                                  • 細胞預實驗
                                                    質粒構建表達檢測
                                                    慢病毒包裝與純化
                                                    穩定株篩選及鑒定
                                                  • 構建好的穩定株
                                                    穩定株構建說明書
                                                    構建的質粒，病毒等

                                                  已構建的穩定株列表（部分）

                                                  中文名稱 對應穩定株 對應培養條件 細胞來源
                                                  人腦星形膠質母細胞瘤 U-87 MG-luc-mNeonGreen-Puro MEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人膠質瘤細胞 U251-CMV-EGFP-Puro DMEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人膀胱移行細胞癌細胞 T24-EGFP-Puro RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人胰腺癌細胞系 SW 1990-EGFP-Puro L-15+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人神經母細胞瘤細胞 SK-N-SH-EGFP-Puro MEM+10%FBS+0.4ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人乳腺癌細胞 SK-BR-3-EGFP-Puro DMEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人子宮頸鱗癌細胞 SiHa-CMV-EGFP-Puro DMEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠腦神經瘤細胞 Neuro-2a-EGFP-Puro MEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠腦神經瘤細胞 Neuro-2a-CMV-Puro MEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人乳腺癌細胞 MDA-MB-468-EGFP-Puro L-15+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人乳腺癌細胞 MDA-MB-231-CMV-EGFP-Luc-Puro L-15+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人乳腺癌細胞 MCF7-CMV-EGFP-Puro MEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠肺癌細胞 LLC-CMV-sfGFP-Luc-Puro DMEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人慢性髓原白血病細胞 K-562-CMV-EGFP-Puro RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人T淋巴細胞白血病細胞 Jurkat-CMV-EGFP-Puro RPMI-1640+10%FBS+0.5ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人子宮內膜癌細胞 ishikawa-CMV-Puro RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人肝癌細胞 HuH-7-CMV-sfGFP-Luc-Puro DMEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人肝癌細胞 HuH-7-Luc Puro DMEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人結腸癌細胞 HT-29-EGFP-Puro McCoy’s 5A+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人肝癌細胞 Hep G2-CMV-EGFP-Luc-Puro DMEM+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人肝癌細胞 Hep G2-CMV-Puro DMEM+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人宮頸癌細胞 HeLa-EGFP-Puro DMEM+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人宮頸癌細胞 HeLa-RFP-Puro DMEM+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人結腸癌細胞 HCT 116-CMV-EGFP-Luc-Puro McCoy’s 5A+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人咽鱗癌細胞 FaDu-CMV-EGFP-Puro MEM+10%FBS+1ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠結腸癌細胞 CT26.WT-CMV-Luc-Puro RPMI-1640+10%FBS+8ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠結腸癌細胞 CT26.WT-CMV-Puro RPMI-1640+10%FBS+8ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞 Caki-1-EGFP-Puro DMEM+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  倉鼠腎成纖維細胞 BHK-21 [C-13]-CMV-Puro MEM+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人甲狀腺乳頭狀癌細胞 B-CPAP-CMV-EGFP-Puro RPMI-1640+10%FBS+1%NEAA+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠黑色素瘤細胞 B16-CMV-Puro RPMI-1640+10%FBS+1ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠黑色素瘤細胞 B16-CMV-EGFP-Puro RPMI-1640+10%FBS+1ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人非小細胞肺癌細胞 A549-CMV-EGFP-Puro F12K+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人非小細胞肺癌細胞 A549-luc-mNeonGreen-Puro F12K+10% FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠乳腺癌細胞 4T1-CMV-Luc-Puro RPMI-1640+10%FBS+1ug/ml Puromycin 中科院
                                                  小鼠乳腺癌細胞 4T1-CMV-EGFP-Puro RPMI-1640+10%FBS+1ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人胃癌細胞 MKN-45-CBh-luc2-mNeonGreenA-Puro RPMI-1640+20%FBS+2ug/ml Puromycin 協和
                                                  人肺腺癌細胞 NCI-H1975-CBh-luc2-mNeonGreenA-Puro RPMI-1640+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院
                                                  人結腸癌細胞 HCT116-CBh-luc2-mNeonGreenA-Puro McCoy’s 5A+10%FBS+2ug/ml Puromycin 中科院

                                                  相關技術服務

                                                  • 細胞增殖

                                                  • 細胞凋亡

                                                  • 侵襲和遷移

                                                  • 細胞周期

                                                  • 雙螢光素酶檢測


                                                  上一篇：沒有了
                                                  下一篇：沒有了
                                                  返回列表
                                                  一鍵撥號 一鍵導航
                                                  ?掃碼反饋

                                                  掃一掃，反饋當前頁面

                                                  咨詢反饋
                                                  掃碼關注

                                                  和元生物

                                                  返回頂部
                                                  天天操天天爽天天干_夜夜精品无码一区二区三区_黄片免费在线观看欧美_欧美片亚洲片妖精视频