AAV股票代碼
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                                                  CRISPR/Cas9

                                                  CRISPR/Cas9

                                                  全國服務熱線400-151-5198      業務咨詢15800353038

                                                  CRISPR/Cas9 是一種能夠對基因組的特定位點進行精確編輯的技術。其原理是核酸內切酶Cas9蛋白通過導向性RNA(guide RNA, gRNA)識別特定基因組位點并對雙鏈DNA進行切割,造成DNA雙鏈斷裂,細胞利用非同源末端連接(Non homologous End Joining,NHEJ)或者同源重組(Homologous Recombination, HR)方式對切割位點進行修復,實現DNA水平基因敲除或精確編輯。
                                                    CRISPR/Cas9 系統主要由兩部分組成:
                                                    1. 單鏈的guide RNA(single-guide RNA,sgRNA)
                                                    2. 有核酸內切酶活性的Cas9 蛋白

                                                   CRISPR基因敲除

                                                    以基因敲除為目的時,可以利用Cas9-sgRNA對DNA進行切割產生雙鏈斷裂,隨后細胞通過非同源末端連接方式修復DNA,在此過程中,將隨機引入堿基的缺失或增加,基因發生移碼突變,導致編碼基因的敲除?! ?/div>

                                                  CRISPR基因編輯  

                                                    以基因敲入或替換為目的時,需要借助同源重組原理。CRISPR/Cas9系統中的Cas9-sgRNA在靶位點進行切割產生DNA雙鏈斷裂,在模板DNA存在時,細胞通過同源重組方式修復DNA,而模板DNA可以被人為設計成需要插入的基因或需要修復的基因,此時細胞編碼目的基因。

                                                  載體的選擇(部分)

                                                    提供病毒載體的含Cas9蛋白的單載和雙載系統,可根據目的基因序列設計多條gRNA,載體帶有多種熒光抗性標記,方便篩選。
                                                  載體類別 編號 載體元件
                                                  CRISPR慢病毒單載體 H5070

                                                  pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-Puro-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE

                                                  H7072

                                                  pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-BSR-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE

                                                  H6825

                                                  pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-sfGFP-P2A-3xFLAG-spCas9-WPRE

                                                  CRISPR慢病毒雙載體 H5068

                                                  pLenti-U6-spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE

                                                  H5450

                                                  pLenti-CMV-Puro-P2A-3xFLAG-espCas9_1.1-WPRE

                                                  CRISPR  AAV單載體系統 H6941

                                                  pAAV-CMV-SaCas9-U6-sagRNA v2.0

                                                  H5273

                                                  pAAV-hSyn-SaCas9-U6-sagRNA v2.0

                                                  CRISPR  AAV雙載體系統 H6291

                                                  pAAV-CMV-EGFP-WPRE-U6-spgRNA v2.0

                                                  H12663

                                                  pAAV-U6-shRNA/spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE

                                                  H11012

                                                  pAAV-CMV-Luc2-WPRE-U6-spgRNA


                                                   病毒載體服務流程
                                                   

                                                  • 物種及目的基因名稱
                                                    病毒載體要求與選擇
                                                    其它特殊需求
                                                  • Cas9病毒載體構建
                                                    病毒包裝與純化
                                                    滴度測定
                                                  • 高滴度的病毒顆粒
                                                    按合同提供對照病毒
                                                    實驗報告
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